网站首页>问答首页>NGS技术在出生后单基因遗传病诊断中的应用

NGS技术在出生后单基因遗传病诊断中的应用

来自优孕管家 的问题 2022-10-20
NGS技术在出生后单基因遗传病诊断中的应用
俄罗斯试管婴儿
248人浏览
指导意见:

已知的单基因病致病基因和遗传方式大部分已明确,不受环境因素的影响。目前,已知的人类单基因遗传病已超过10000种,尽管单基因病个体发病率很低,但人群总发病率仍较高,约为1/100。大部分单基因病具有致死性、致残性或致畸性,临床表现多样,因此诊断准确率不高。传统的单基因遗传病检测方法主要为Southern印迹法、Sanger测序,以及以PCR技术为基础的各种检测手段。



传统检测方法的操作步骤复杂、通量低,不易检测出未知的突变位点和进行全基因组范围内的基因突变分析。通过先进的NGS技术可对上千种由于基因变异(基因突变、平衡异位、微缺失等)导致的遗传病进行检测,且可在早期对胎儿的脱落细胞或者绒毛膜进行检测,在产前就可确认胎儿是否患有遗传病。目前,NGS技术应用于单基因遗传病的形式有目标序列捕获高通量测序技术(Panel)测序、全外显子组测序、全基因组测序和转录组测序等。



Panel测序通过靶向某一已知疾病的全部致病基因,能够快速高效地分析给定样本是否患有

该疾病,根据临床诊断需要自由设计Panel,灵活方便,但不能有效地预测新的致病基因和对未知疾病的致病基因进行诊断。当Panel测序诊断结果为阴性,或者临床表型比较复杂时,就需要行全外显子组测序和全基因组测序,以进行更大范围的筛查。全外显子组测序是指对个体外显子区进行测序的方法,一般包括22000个左右的编码基因,能够更快地确定致病基因及其突变位点,但不能获得完整的基因组信息,且不适用于非编码区突变和DNA结构变异等检测。



全基因组测序是对某个体基因组的测序,不仅能够明确患者的基因谱,而且能够检测出更多的突变类型,如一些结构变异、拷贝数变异等;但该方法价格昂贵且数据量大,导致数据储存和结果解读十分困难。全外显子组测序和全基因组测序应用于潜在遗传病(尚未确诊)的分子诊断时,诊断准确率为25%~52%。通过TRIO测序(患者及其父母共同进行测序),有助于发现父母不存在,而孩子新发生的突变(新发突变)和潜在的隐性遗传突变。



转录组测序主要是通过对某一物种特定细胞或组织在某个状态下的转录本和基因序列进行测序,以研究基因的表达情况,从而对非编码区功能、结构和新转录本的预测等进行研究。

约翰·威尔考克斯 专家
专注于试管婴儿,辅助生殖
已帮助 9552
相关推荐
试管移植过程中感冒了怎么办?
优孕管家 2022-10-20 265人浏览
最佳回答:

对于普通感冒,仅有鼻塞、打喷嚏、鼻涕及轻度咳嗽,无发热,一般来说对胎儿影响不大。且感冒均有自限性,大部分5-7天可缓解。对于重度、流行性病毒性感冒,如果持续高热,会对胎儿有一定影响。有研究表明,母体体温较基础值升高1.5℃~2.5℃(体温达到 38.5℃ ~ 39.5℃ 时)即有致畸作用,因为母体的体核温度可以影响胎儿的细胞分裂,并导致神经管畸形、胎儿发育异常和先天性心脏病等,流产、死胎、死产等发生率增加。因此,在试管婴儿过程中,确认或疑似流感,需尽早开始抗病毒治疗及相应治疗。



促排前感冒:对于即将进行促排卵的女性朋友们而言,如果在促排前不小心感冒了,建议暂时先放弃本次促排卵,待身体恢复后再进行。因为,“感冒药”很有可能会影响卵泡的质量。



促排时感冒:如果在促排卵期间感冒,只要体温未达到38摄氏度的话,那最好的处理方式就是多喝水、多休息。但如果体温超过38摄氏度,那就需要在医生的指导下服药。另外,如果连续很长一段时间,体温都处于38摄氏度以上的话,则建议暂时先取消本次周期。



移植前感冒:胚胎移植是整个试管周期中最为关键的一个环节,如果在这个环节前感冒了,建议暂时不要移植,待身体完全恢复之后,再进行移植。



移植后感冒:胚胎移植到胚胎着床的这段时间,是试管婴儿疗程中最为关键的一段时间。如果在此期间感冒了,一定要及时与主治医生取得联系,并在主治医生的知道下,进行服药等工作。这样才能有效保障服用的药物不会对移植产生影响。



预防很重要:出门注意食物安全卫生,及时增减衣物,适度锻炼,避免过度劳累,保证充足睡眠。饮食上注意充分饮水,保证水果蔬菜绿色新鲜,适量补充维生素C。保持室内空气流通。在流感期间需注重饮食、饮水卫生。出游前特别要了解目的地的疾病流行现状,做好相应的防护措施,出现不适,及时就诊。

试管移植前子宫内膜越厚越容易着床吗?
优孕管家 2022-10-20 317人浏览
最佳回答:

子宫内膜是受精卵赖以生长、发育的摇篮。一旦女性因各种原因伤害了它,让它变得很薄很薄,受精卵便无法在其中着床然后出现不孕、流产等后果。



子宫内膜由“功能层”和“基底层”组成,“功能层”在表面,“基底层”在深部。周期性脱落变成月经的那层就是功能层,它肩负着为受精卵着床做准备的责任。月经来完后,基底层上面会形成新的功能层,如此循环反复。因为这种周期性的增殖、脱落,子宫内膜的厚度会随着月经周期发生改变。根据这种不同的变化分成月经期、增殖期、分泌期这三个时期。



月经期:一般是来月经的第1~5天。此时随着雌、孕激素的快速减少,子宫内膜脱落、出血,厚度约为1~4毫米。  



增殖期:一般是来月经的第5~14天。在这段时间子宫内膜会迅速增厚,一般厚度会从4毫米增长至14毫米。



分泌期:一般是月经周期的第15~28天,也就是排卵期的前后。此时有利于受精卵着床,子宫内膜的厚度可达7~14毫米。



月经期如果女性子宫内膜厚度为8~12毫米,那恭喜您,非常适合妊娠;如果<7 毫米,则为薄型子宫内膜;如果 ≤5 毫米,即属超薄型子宫内膜;如果子宫内膜厚度>18毫米,那就属于子宫内膜异常增厚。



子宫内膜增厚是常见的妇科疾病,会造成不孕、月经不调、阴道出血等诸多危害。子宫内膜增厚的原因较多,卵巢功能紊乱、雌激素分泌不均衡、肥胖等都可能引起子宫内膜增厚。



子宫内膜变薄的原因



不当人流和刮宫:多次机械性操作造成子宫内膜的基底层受损害,从而导致功能层不能很好的生长,甚至完全丧失,造成子宫内膜变薄。炎症:各种急性或慢性感染,包括结核病导致子宫内膜受感染出现坏死,子宫内膜功能丧失。药物影响:有些药物可导致雌激素水平低下,从而影响子宫内膜的生长。发育异常:有些患者子宫发育异常,如为单角子宫或纵膈子宫,它的内膜也随之发育不正常。


如何提高子宫内膜厚度



补充雌激素:内膜是在雌激素刺激下生长的,目前许多医院(西医)用来改善内膜厚度的方法不外乎使用雌激素,但是,西药雌激素对内分泌有一定的干扰作用。备孕女性在采用之前一定要遵循医生的建议,不要盲目使用药物。



雌激内膜生长的食补:黄豆,可常吃豆腐、豆浆等豆制品,既富含蛋白质,黄豆中又含有一种叫大豆异黄酮的天然雌激素。



当归:从中医的角度来说,当归含有类雌激素作用的物质,有利于活血化淤,促进子宫内膜修复。可以从药店购买当归片泡水喝,或者煮水喝。



服用维生素E:维生素E是一种脂溶性维生素,又称生育酚,是主要的抗氧化剂之一。使女子雌性激素浓度增高,提高生育能力,预防流产。



好心情:对于备孕女性来说,放松心情其实是调节内分泌的一个有效的方法,这一点非常重要,在良好情绪作用下,女性不仅能够拥有更多的健康,而且会提高备孕几率。

多囊卵巢综合征心理不佳的原因
优孕管家 2022-10-20 283人浏览
最佳回答:

多囊卵巢综合征是(PCOS)是育龄期妇女最常见的内分泌代谢疾病,多在青春期发病,以雄激素过高或生化表现,持续无排卵、卵巢多囊改变为特征,表现为多毛、痤疮、月经异常、不孕等,常伴有胰岛素抵抗与肥胖。此外,多囊卵巢综合征发生糖尿病、高血压、子宫内膜癌等远期并发症的机会比正常人增多。



多囊卵巢综合征在世界范围内发病率呈现较高趋势,国外报道PCOS患病率大约为5%~10%,在不孕症患者中发病率可达50%~70%。研究发现普通人群中PCOS伴抑郁症患者的发生率增加了一倍以上,这一结果提示,临床医生应关注PCOS患者的心理健康。另外,现在普遍认为精神、心理因素异常也可引起神经内分泌功能紊乱。由此可见,上述两者是互为因果的。PCOS妇女的情感症状需要进一步探索,包括与该综合征特定特征相关的检查。



引起PCOS的病因现在已经有了相对成熟的研究与论述,PCOS合并负性情绪的病因机制研究较少,有限的研究集中在血清雄激素、胰岛素抵抗、促甲状腺激素等。据悉,低经济收入水平对于心理幸福感的影响超过激素,有学者认为自我感知的经济状况是PCOS妇女总体幸福感的最强预测因素。另外,PCOS的负性情绪还可能与5羟色胺,教育程度、年龄、收入、腰围和痤疮等各方面因素的影响,这些因素的影响还需要日后进一步研究证明。



而祖国医学并无多囊卵巢综合征这一病名,多归属于“月经后期”“闭经”“崩漏”“不孕”等范畴。PCOS引起的焦虑抑郁则对应中医的郁证,表现为心情抑郁、情绪不宁、胸部满闷、胁肋胀痛,或情绪易怒、欲哭,或咽中如有异物梗阻等症,由情志不畅所引起。肝失疏泄,脾失健运,心失所养,脏腑阴阳气血失调是主要病机。对于PCOS合并的负面情绪的病因病机则参考相关疾病及郁证进行阐述。

试管促排期间所有姐妹都必须知道的问题!
优孕管家 2022-10-20 181人浏览
最佳回答:

1、做试管婴儿大概需要多长时间?



试管婴儿助孕时间长短除了与您的不孕原因有关外,主要还和促排方案有关,我科常见的促排方案卵泡期长效长方案,主要包括以下几个阶段:降调节-  促排卵-取卵-移植-验孕。



降调节一般于卵泡期(月经第2-3)给予长效GnRHa(促性腺激素释放激素激动剂,如醋酸亮丙瑞林)3.75mg进行降调节,降调节28-42天给予Gn(促性腺激素)至卵泡成熟时注射HCG(夜针),注射HCG 36小时左右取卵,自取卵日开始给予黄体支持。



若在促排期间无相关并发症,在取卵后3-5天进行胚胎移植,移植第3天的卵裂期胚胎于移植后12-14验孕,移植第5-6天的囊胚于移植后10-12天验孕。所以从您开始接受降调节治疗到知道自己是否成功妊娠大概需要2个月左右的时间,如果您对时间有特别的要求,可以在试管检查期间或建档日当日提出,我们将结合您的病情和您的时间要求制定适合您的方案。



2、什么是降调节?为什么要进行降调节治疗呢?



正常女性每个月一般只有一枚优势卵泡发育并排出,其余的卵泡将在不同阶段闭锁、消失,在试管婴儿技术中,获得一批齐同(即大小均一)、优质的卵泡是试管婴儿成功的第一步,也是非常关键的一步。所谓降调节,就是用外源性的药物将卵巢功能暂时性的压制下去,让卵巢内的窦卵泡(基础小卵泡)处于“同一起跑线”状态,当达到满意的降调效果后再用促排卵药物,有发育潜能的窦卵泡就会发育,最终成为我们试管婴儿的目标卵泡,也就是我们的“宝宝种子”。



通过降调节,抑制或者减少自发性LH峰的出现,避免自发排卵,增加卵泡募集的数量,使卵泡发育同步化,争取得到更多同步化发育的卵泡,从而提高试管婴儿的成功率。



3、降调节28天返院当天就开始打促排卵针吗?



降调节28天返院抽血+B超,根据降调节天数,FSH、LH、E2水平及卵泡大小可决定Gn启动时机。我们中心一般在卵泡>7mm,可在降调28-32天启动,卵泡在4-6mm,可在降调33-37天启动,卵泡<3mm,可于降调38-40天启动。


4、降调节药物有哪些?降调节期间阴道出血正常吗?



目前国内外常规的降调药物包括短效降调药物和长效降调药物,国内市面上常见的短效降调药物主要是曲普瑞林(如:进口的达必佳),剂量 0.1mg/支,需要每日注射才能达到降调效果。长效降调药物主要亮丙瑞林(如:国产的博恩诺康,进口的抑那通)或曲普瑞林(如:进口的达必佳、达菲林),剂量都是3.75mg/支,一般只需当日单次注射。机体达到降调效果后体内雌激素会下降,出现阴道出血属于正常的药物降调后结果,阴道出血的时间和量也会因为达到降调所需的时间和降调的深度而不尽相同,一般首次注射后的十天左右会出现阴道出血,所以大家不必担心,更不能因为有阴道出血而自行停药而影响后续治疗。只需按照中心所交待的时间如期返诊即可。



5、降调后会出现什么不良反应?该如何应对?



“由于雌激素的水平下降,血中钙水平也有所下降,会有一阵阵地发热、出汗、伴有头晕、心慌,持续时间为一两分钟或 12~15 分钟不等。



由于促性腺激素分泌增多及植物神经系统功能紊乱,可表现为月经紊乱,阵发性潮热、潮红、出汗、失眠、头晕、头痛、急躁易怒或情绪低落、多疑、阴道干涩、性欲降低等一系列或轻或重的类似围绝经期的表现。



症状较轻者不需要反向添加雌激素,也不要过分担心,只需调整心态,适当转移注意力,上述症状会随着Gn启动后卵泡生长、激素水平恢复而很快减轻并消失。



6、为什么要反复做B超和抽血?



促排卵过程中需要通过阴道 B 超和测定血清激素水平来动态监测卵泡生长、发育的情况,以确定卵泡生长与成熟情况,并确定最佳取卵时间。



7、促排期间出现腹胀,正常吗?



促排的目的就是让一批优质卵泡发育,故此时的卵泡较平时多,卵巢也在逐渐增大。在这个过程中机体出现轻微腹胀甚至腹痛是属于正常现象。大家不必担心。促排期间尽量避免剧烈运动及突然的体位改变(如翻身、下蹲、用力提重物等),以免发生卵巢扭转等严重并发症。另外,由于卵泡的生长和激素水平增高,可能出现卵巢过度刺激综合征,此时多食高蛋白质物可减少腹水的产生。


8、促排后白带增多,正常吗?



促排期间随着卵泡发育,体内雌激素水平也逐渐上升,受高雌激素影响,阴道分泌物(即俗称的白带)也会增多,且类似于排卵期时出现的蛋清样白带。



9、促排期间卵泡会不会自己提前排掉?



目前的试管婴儿技术大部分采用降调方案,即用药物控制住引起排卵的“LH峰”。即使不是降调方案,也是动态抽血监测体内的 LH 浓度,一旦发现有上升趋势,可及时用药物抑制 LH 峰。所以,采用降调方案后,卵泡在取卵前排掉的情况比较少见,但不能完全杜绝。



10、降调和促排期间能否性生活?



在降调和促排早期可进行性生活,但需要用避孕套避孕。当卵泡生长到 14mm 以上时,禁止同房。因为此时期,卵泡较大,卵巢也相应增大,如果活动剧烈,可出现卵巢扭转或破裂。



11、促排期间有什么需要注意的事项?



如出现发热、咳嗽、腹泻、皮疹及其他内外科疾病,及时在当地综合医院或我院相应科室就诊,选择合适的药物及时治疗,并且及时告知主管医生。



12、促排卵药物需要持续注射多长时间?



由于存在个体差异,每个人对药物的反应不一样,所以注射促排药物用时也不同,一般 7~12 天左右。当主导卵泡群有 2~3个直径≥18mm时,结合激素水平,停用促排卵药物,确定“夜针”时间(夜针即艾泽或 HCG,作用为促进卵母细胞最终成熟)。



13、打针期间能否上班?饮食、活动、睡眠有何特殊要求?



在降调节及促排卵早期正常饮食起居,不影响就诊的前提下可以上班,可适当增加营养。



在促排卵后期要注意多休息,避免重体力劳动及剧烈活动。在起床、如厕、翻身时动作缓慢,避免快速改变体位引起卵巢扭转。饮食以优质动物蛋白为主,适当食用鸡汤、鱼汤、冬瓜汤和新鲜果汁。避免感冒和腹泻。


14、回家自己打针,需注意哪些问题?



降调和促排的药物有肌肉注射和脐周皮下注射,治疗过程中掌握注射方法及剂量,避免回家打错针,用药过程每日均需注射,不能中断。调和促排的药物大部分需要 2~8℃保存,往返医院路上需要用冰包和冰袋保存携带,回家后放置冰箱 2~8℃冷藏保存,不能冷冻。

试管婴儿移植的胚胎应该如何选择?
优孕管家 2022-10-20 244人浏览
最佳回答:

一、胚胎的生长速度:精子和卵子混合后16-20小时卵子出现雌和雄二个原核,24-26小时开始分裂成二细胞,44-48小时分裂为四细胞,64-72小时成为6-8细胞,105-110小时后变成囊胚。现在我们进行的试管婴儿治疗,一般在取卵后第2或3天进行移植的,所以,2天时应该是2-6细胞,3天时应该是4-8细胞的胚胎,否则是发育迟缓或生长过快的胚胎,就是移植了,胚胎的种植率也远远低于正常的。



二、胚胎中卵裂球的形态:卵裂球的形态就是胚胎中每个细胞的大小是否一致、形状是否相似以及是否相互对称。我们首先选择的就是那些大小一致和形状对称的胚胎,这些胚胎的受孕的可能要比其他的胚胎大。现在也有人认为,可以通过观察受精后16-20小时卵子出现雌和雄二个原核的形态来帮助判断胚胎的种植能力。



三、胚胎中碎片的多少:胚胎的碎片是卵裂球之间一些大小形态不同的颗粒,是胚胎发育过程中的不良代谢产物,一般认为与卵子本身的质量和胚胎体外培养环境的不良刺激有关。在许多的试管婴儿中心,把碎片体积少于胚胎体积5%的胚胎认为是好的,25%以下是可以用的,碎片体积大于50%的胚胎一般不再进行移植或冷冻。



试管婴儿胚胎移植试管婴儿过程中最重要的就是试管婴儿胚胎移植过程了。经历漫长的术前准备、促排卵和取卵,下一步就要进行胚胎移植了,大家都知道这是很关键的一项操作,却又因为不了解,往往比较紧张。那么进行试管婴儿胚胎移植需要注意什么?



移植当天,要把拟移植胚胎从培养皿挪至移植皿、对胚胎质量进行评分及出具胚胎培养报告单,做完这些,移植一般从上午十点左右开始。



冷冻囊胚是在当天早晨解冻,要培养一段时间,所以移植顺序是先移植新鲜胚胎、囊胚和冷冻胚胎,最后移植冷冻囊胚。



移植是在腹部B超引导下进行,要求憋尿,原理一是形成液体窗后,在B超下可以清晰看到移植管走向,从而可以把胚胎放在每个人最理想的位置;二是憋尿后可以将前屈的子宫压平,更易于移植管进入宫腔。



因此憋尿很重要,建议晨起就开始憋尿,不要到移植将近时才大量喝水,否则憋尿不够,患者容易焦虑、紧张,另外移植完该静卧时多次起身去小便也会有不利影响。



憋尿的程度以有尿意为宜,太少,B超下看不清移植管和胚胎释放位置,或者宫颈管和宫体之间有拐角,移植管不好进入;太多,患者难受紧张。这些都不利于胚胎种植。憋尿太多完全可以提前排出一部分。



整个过程一般没有任何感觉,费时不超过5分钟,需要你做的就是适当憋尿,放松心情,不要紧张!让我们一起配合,完美完成移植。祝大家好孕!